DIAXXOPCR MOSTRA-SE UMA ALTERNATIVA PROMISSORA AOS MÉTODOS MOLECULARES TRADICIONAIS NO DIAGNOSTICO DE HELMINTOS TRANSMITIDOS PELO SOLO
- Nercio Machele
- há 21 minutos
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Os helmintos transmitidos pelo solo (HTS) são vermes parasitas intestinais que afectam sobretudo populações em contextos com acesso limitado à água, saneamento e higiene (WASH), como ocorre em muitos países de baixa e média renda, incluindo Moçambique. Entre os principais agentes destacam-se Trichuris trichiura, Ascaris lumbricoides e Strongyloides stercoralis, parasitas que continuam a causar anemia, desnutrição e atrasos no desenvolvimento cognitivo infantil em comunidades vulneráveis.
Para maximizar a utilização de uma colecção de amostras obtidas no ensaio clínico ALIVE, conduzido pelo Centro de Investigação em Saúde de Manhiça (CISM) e parceiros do projecto STOP, avaliou-se o desempenho de um novo sistema molecular para o diagnóstico destes parasitas. Os resultados revelaram que o método atinge níveis de sensibilidade (capacidade de detectar verdadeiros positivos) e especificidade (capacidade de detectar verdadeiros negativos), posicionando-se como uma alternativa viável aos métodos moleculares tradicionais em ambientes com recursos limitados.
Actualmente, o diagnóstico dessas infecções é com base em técnicas de microscopia convencional, que, embora amplamente utilizadas, têm limitações: baixa sensibilidade, especialmente quando a carga parasitária é baixa, exigência de pessoal bem treinado e maior tempo de processamento, nem sempre compatível com a realidade dos laboratórios de regiões remotas. Para superar esses desafios, a equipa do CISM e parceiros internacionais testaram o diaxxoPCR, um sistema de diagnóstico molecular por PCR em tempo real baseado em cartuchos (“pods”) e pensado para ser simples, rápido, adaptável a laboratórios com infraestrutura limitada – incluindo unidades móveis – e sem dependência de equipamentos de refrigeração para conservação dos reagentes.
O estudo foi realizado em três etapas distintas: a primeira para validação técnica com amostras de DNA definidas, seguida pela comparação directa do diaxxoPCR com uma PCR em tempo real tradicional utilizando DNA extraído de amostras de fezes de 325 crianças do distrito da Manhiça que participaram no estudo ALIVE, e por fim, uma prova de conceito de um cartucho multiplex capaz de detectar simultaneamente os três parasitas na mesma amostra.
Na avaliação técnica, a plataforma mostrou excelente reproductibilidade, com pouca variação entre réplicas (mesma amostra testada várias vezes) e entre ensaios diferentes (mesma amostra testada em dias diferentes, por operadores e em laboratórios diferentes). Na comparação com o padrão de referência, os resultados foram particularmente encorajadores: o diaxxoPCR apresentou sensibilidade superior a 97% e especificidade acima de 94% para os três parasitas avaliados. Também se verificou forte correlação entre os valores quantitativos gerados pelos dois métodos (Ct na qPCR tradicional e Cq no diaxxoPCR), reforçando a concordância qualitativa e quantitativa das técnicas. Na fase final, o cartucho multiplex demonstrou ser capaz de identificar correctamente os três helmintos simultaneamente, comprovando a viabilidade de um teste integrado.
Segundo o autor principal do estudo, Augusto Messa Jr., estes resultados representam um avanço estratégico para o controlo das helmintíases no país: “Este estudo tem grande relevância para a saúde pública, e para Moçambique especificamente, pois demonstra que é possível ter um teste molecular rápido, preciso e fácil de usar, que pode revolucionar o rastreio de helmintíases e outras doenças em zonas rurais ou em laboratórios com poucos recursos. Essa tecnologia pode contribuir significativamente para o fortalecimento dos programas de controlo”.
Financiado pela Parceria de Ensaios Clínicos da Europa e Países em Desenvolvimento (EDCTP), o projecto STOP foi levado a cabo em Moçambique, Etiópia e Quénia, sob a coordenação do Instituto de Saúde Global de Barcelona (ISGlobal).
Referência:
Messa Jr. A, Bengtson M, Fleitas P, Montemartini L, Novela V, de Jesus Á, Krolewiecki A, Schindler T, Muñoz J, Mandomando I, van Lieshout L. Performance evaluation of the diaxxoPCR system for rapid and user-friendly stool-based diagnosis of trichuriasis, ascariasis and strongyloidiasis in Mozambique. PLoS Negl Trop Dis. 2025 Nov 11;19(11):e0013711. doi: 10.1371/journal.pntd.0013711.